Free
Radicals Assay Kit je určen ke kvantitativnímu stanovení celkového obsahu
volných radikálů v lidském séru. Souprava umožňuje spektrofotometrickou detekci
volných radikálů ve zkumavkách a mikrotitrační destičce.
Free
Radicals Assay Kit obsahuje všechny potřebné reagencie pro kvantitativní detekci
volných radikálů (FR).
Čas
potřebný pro inkubaci vzorku: |
15
min |
Kalibrační rozmezí: |
1.5
– 12.0 mmol/l Fe2+ |
Detekční limit: |
0.71
mmol/l |
Sensitivita: |
1.9
x 10-3∆A per 1 mmol/l Fe2+ |
Referenční meze: |
4.46
± 1.38 mmol/l |
Volné
radikály jsou atomy, molekuly či ionty obsahující ve své konfiguraci nepárový
elektron, jsou proto velmi reaktivní. Pokud volný radikál odebere elektron
okolní molekule, vznikne tak další volný radikál, který dále odebírá elektron z
ostatních molekul či buněčných struktur. Vzhledem k tomu, že volné radikály
obsahují nepárový elektron, jsou vysoce chemicky reaktivní. Výrazně a
nespecificky reagují s biomolekulami včetně DNA, lipidů, proteinů, karbohydrátů.
Poškozením těchto molekul dochází k mutacím nukleových kyselin, peroxidaci
lipidů a oxidaci proteinů.
Volné
radikály mohou vznikat uvnitř organismu, ale i z externích vlivů. V organismu
hrají volné radikály důležitou roli v procesu zvaném oxidativní vzplanutí a jsou
především také nepostradatelnou součástí mitochondriálního dýchacího řetězce.
Tuto činnost FR můžeme považovat za užitečnou snahu chránit organismus a to na
rozdíl od všech druhů stresu, při kterých dochází k nekontrolovanému vzniku
různých volných radikálů. Za fyziologických podmínek je v organismu ustálená
rovnováha mezi VR a antioxidanty. Porušení této rovnováhy v neprospěch
antioxidačního systému je označováno jako oxidační stres, který nastává při
zvýšené tvorbě VR nebo při nedostatečné antioxidační ochraně organismu. Klinické
projevy oxidačního stresu jsou výrazně spojeny s mnoha chorobami zahrnujícími
např. diabetes, nádorové bujení, aterosklerózu, neurodegenerativní onemocnění,
hypertenzi, Crohnovu chorobu a další.
Mezi
externí zdroje volných radikálů patří UV záření, kouření a mnoho látek
znečišťujících okolní prostředí.
Stanovení volných radikálů je založeno na schopnosti chlorofylinu (sodno-měďnatá
sůl chlorofylu) přijímat a odevzdávat elektrony za současné stabilní změny
absorpčního maxima. Tento efekt je podmíněn alkalickým prostředím a přídavkem
katalyzátoru. Kvantifikace naměřených hodnot absorbancí je umožněna kalibrací,
která je založena na schopnosti Fe iontů v alkalickém prostředí přecházet z
dvojmocných na trojmocné.